Другие фракции клейковины (часть 2)

26.06.2012 | Автор: Ira_Danko

Разделение клейковины на фракции, отличные от глиадина и глютенина, возможно также с помощью методики, предложенной Куком и Алсбергом (Сооk, 1931; Сооk, Аlsberg, 1931). Указанные авторы стремились получить глиадин, и особенно глютенин, по возможности в нативном виде, для чего требовалось избежать применения спирта, щелочи или кислоты, заметно денатурирующих глютенин в процессе его выделения. С этой целью они диспергировали сырую клейковину в 30%-ном водном растворе мочевины, которая хотя и денатурирует белки (Норkins, 1930; Вurk, Grееnberg, 1930; Вurk, 1937, 1938), но, по-видимому, значительно слабее, чем щелочь или кислота. Дисперсия клейковины очищалась в суперцентрифуге от крахмала и затем глютенин осторожно высаливался сернокислым магнием, добавляемым до 0,18 от насыщения. Дальнейшее добавление сернокислого магния приводило к высаливанию глиадина. Как упоминалось выше, полученные таким образом препараты глиадина и глютенина заметно отличаются от аналогичных белков, выделяемых по Осборну или по Блишу и Сандстедту. Наиболее же интересным является тот факт, что, увеличивая постепенно количество сернокислого магния, добавляемого к дисперсии клейковины в растворе мочевины, можно получить любое число белковых фракций, заметно отличающихся по своему составу и свойствам как от глиадина, так и от глютенина. В опытах Кука было получено 6 таких фракций, причем автор рассматривал их как смеси различных количеств глиадина и глютенина. Однако подобное объяснение кажется мало убедительным, так как при наличии в клейковине двух резко отличающихся по растворимости фракций осаждение их не могло бы иметь столь постепенного и плавного характера, как это наблюдается в действительности. Нам кажется, что описанные опыты подтверждают мысль о возможности разделения клейковинного белка по иным связям, чем в случае выделения глиадина и глютенина.
Следующий способ фракционирования клейковины был предложен Сандстедтом и Блишем (Sandstedt, Вlish, 1933; Вlish, 1945), а затем применялся с некоторыми видоизменениями и другими авторами (Наrris, Ваilеу, 1937; Stockelbach, Ваilеу, 1938). Сырая клейковина диспергируется в 0,05—0,1 n уксусной кислоте, добавляется небольшое количество сернокислого калия (или другой соли) и этиловый спирт до концентрации 50% по объему. При постепенном охлаждении раствора происходит выделение ряда белковых фракций, количество и характер которых очень сильно меняются в зависимости от применяемой методики. Достаточно, например, заменить сернокислый калий хлористым натрием, этиловый спирт метиловым, или изменить последовательность прибавления к дисперсии соли и спирта, чтобы получить большое разнообразие фракций, различающихся по своей растворимости и выпадающих в осадок то при одной, то при другой температуре. С большой степенью условности все эти фракции объединяют по признаку постепенного возрастания их растворимости в три большие группы: глютенин, мезонин и глиадин. При использовании сернокислого калия и этилового спирта глютенин выделяется из раствора при температуре 18—20° и составляет 20—35% от всей клейковины, мезонин оседает при 10—14° и составляет 15—25%, и, наконец, глиадин может быть выделен при охлаждении до 4° и ниже, причем количество его колеблется около 50% от веса клейковины. Условность подобной классификации подтверждается большими колебаниями соотношения трех указанных фракций в клейковине из различных сортов пшеницы (Наrris, Ваilеу, 1937). В то же время показано, что по аминокислотному составу глютенин и мезонин, полученные из одной и той же клейковины, заметно отличаются друг от друга. Соответствующие данные, взятые из работы Штокельбах и Бэйли (Stockelbach, Ваilеу, 1938), приведены в табл. 36.

Рубрика: Клейковина пшеницы

Все о зерне

Другие фракции клейковины (часть 2)